植物生理学与分子生物学实验

一、水分生理
实验1 植物组织含水量的测定 003
实验2 植物组织水势的测定（小液流法） 005
实验3 植物的溶液培养及缺素症观察 008
实验4 植物的单盐毒害及离子拮抗现象 012
实验5 植物叶片蒸腾强度的测定 014
实验6 植物氮素的吸收、同化及转运分析016
实验6-1 硝酸根含量的测定 016
实验6-2 铵根含量的测定 018
实验6-3 硝酸根吸收及转运活性的测定 020
实验6-4 硝酸还原酶活性的测定 024
实验6-5 亚硝酸还原酶活性的测定 026
实验6-6 谷氨酸合成酶活性的测定 028
实验6-7 谷氨酰胺合成酶活性的测定 030
实验6-8 天冬酰胺合成酶活性的测定 032
实验6-9 谷氨酸脱氢酶活性的测定 034
二、光合作用
实验1 K+ 对气孔开闭状态的影响 039
实验2 叶绿体色素的提取、分离、定量及理化性质的鉴定 041
实验3 类囊体膜的分离及希尔反应活性的测定 048
实验4 叶绿体、类囊体膜制备及光合电子传递活性分析051
实验5 乙醇酸氧化酶活性的测定 056
实验6 LI-6400光合仪测定植物光合性能058
实验7 蓝绿温和胶电泳系统分离叶绿体类囊体膜蛋白复合体 064
三、植物呼吸代谢
实验1 小篮子法测定呼吸速率 071
实验2 植物完整线粒体的分离及其活性测定 074
实验3 Chlorolab-2 液相氧电极测定植物组织呼吸速率 078
实验4 线粒体Ⅱ-NAD（P）H脱氢酶（Ⅱ-NDHs）活性测定 082
实验5 线粒体解偶联蛋白（UCP）活性测定 087
实验6 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PDH）活性测定 092
四、植物激素
实验1 细胞分裂素对萝卜子叶增大和叶绿素合成的影响 097
实验2 赤霉素对α-淀粉酶诱导合成的影响 099
实验3 生长素与细胞分裂素对烟草愈伤组织根与芽分化的调控 102
实验4 脱落酸与赤霉素对种子萌发的影响 107
实验5 气相色谱法测定乙烯含量 110
五、植物代谢
实验1
植物花青素含量的测定 115
实验2 植物组织中生物碱含量的测定 117
实验3 植物组织中淀粉含量的测定 119
六、植物生长发育
实验1 光形态建成抑制因子PIFs 在诱导拟南芥下胚轴伸长中的作用 123
实验2 种子活力的快速测定 127
实验3
光质对种子萌发的影响 129
实验4 花粉萌发和花粉活力的测定 131
实验5 种子中蛋白含量的测定 133
实验6 脂肪酸含量的测定 136
七、植物逆境生理
实验1 逆境对植物膜系统的影响 141
实验1-1 质膜透性的测定（电导率法）141
实验1-2 膜脂质过氧化程度的测定 143
实验2 逆境对植物细胞活性氧含量的影响 145
实验2-1 过氧化氢含量的测定 145
实验2-2 DAB染色分析过氧化氢含量147
实验2-3 超氧阴离子含量的测定 149
实验2-4 NBT染色分析超氧阴离子含量 151
实验3 逆境对植物细胞渗透调节物质含量的影响 153
实验3-1 游离脯氨酸含量的测定 153
实验3-2 可溶性糖含量的测定 155
实验3-3 甘氨酸甜菜碱含量的测定 158
实验4 逆境对植物细胞抗氧化酶系统的影响 160
实验4-1 超氧化物歧化酶（SOD）活性的检测 160
实验4-2 过氧化物酶（POD）活性的检测 163
实验4-3 过氧化氢酶（CAT）活性的检测 165
实验4-4 抗坏血酸过氧化物酶（APX）活性的检测 167
实验4-5 谷胱甘肽还原酶（GR）活性的检测 169
实验4-6 谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）活性的检测 171
实验4-7 单脱氢抗坏血酸还原酶（MDAR）活性的检测 173
实验4-8 双脱氢抗坏血酸还原酶（DHAR）活性的检测 175
实验5 逆境对植物细胞抗氧化小分子系统的影响 177
实验5-1 抗坏血酸含量与氧化还原状态的检测 177
实验5-2 谷胱甘肽含量及氧化还原状态的检测 179
八、植物分子生物学技术
实验1 植物核酸的提取和测定 183
实验1-1 植物基因组DNA的提取和测定 183
实验1-2 植物总RNA的提取 187
实验2 PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳实验 190
实验3 基因克隆（RT-PCR）194
实验4 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 197
实验5 质粒DNA的提取 200
实验6 DNA重组 203
实验7 GFP蛋白在大肠杆菌中的诱导表达和纯化 205
实验8 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测GFP蛋白表达 207
实验9 拟南芥的遗传转化——花序浸蘸法 211
实验10 拟南芥T-DNA插入基因型的鉴定 214
实验11 用热不对称交错PCR确定T-DNA插入位点 218
实验12 酵母单杂交技术223
实验13 酵母双杂交技术226
实验14 双分子荧光互补技术（BiFC）229
实验15 Pull down技术232
附录 235
1.常用缓冲溶液的配制 235
2.常用酸碱指示剂的配制 240
3.基本常数 241
4.常用酸碱试剂配制及其相对密度、浓度 242
5.常用有机溶剂及其主要性质 243
6.常见植物生长调节物质及其主要性质 246
7.植物组织培养常用培养基的成分 247
参考文献 249