本书是在版的基础上,吸收了本学科的新进展,增加了大量的新内容,重新审订、编写而成。
全书共十二章,分上下两册,书末附有基因工程名词术语解释及索引。本书由三个有机联系的部分组成。部分论述基因工程赖以创立的理论及技术基础,重点介绍基因研究的发展及基因的现代概念;基因研究与基因工程的相互依赖关系;基因操作主要技术的基本原理;与基因克隆有关的上系列核酸酶的生化特性和在DNA重组中的应用等。第二部分由第四章至第八章组成,系本书的核心。它详细地叙述了基因工程学所涉及的主要内容,包括各类分予克隆载体的构建、特点与应用;基因文库的构建、目的基因的分离与鉴定;克隆基因的表达与调控以及真核基因在大肠杆菌中表达的原理、方法及实例等。第三部分即本书的后四章,主要论述基因工程实际应用方面的内容。它着重叙述高等植物及哺乳动物基因工程的研究目标、现状与进展,以及重组DNA技术在临床医学、农业生产、食品工业、化学制剂等若干重要领域的实际应用情况。
本书是一部有自己特色、体系新颖、基础理论与实际应用并重的基因工程学术专著。在内容的安排上注重科学性、优选性、系统性和条理性。它不仅对我国基因工程的教学与研究,而且对其它生物技术以及分子生物学、分子遗传学等学科的教学与研究都有很好的参考价值。本书可作为生物、农林、医学等专业的本科生、研究生及教师的教学用书,也可作为有关科研人员的参考书。
第二版序言
版序言
章 基因与基因工程
节 基因研究的发展
1.基因学说的创立
2.基因与DNA分子
3.基因与DNA的多核苷酸区段
4.基因与多肽链
5.基因的碱基顺序与蛋白质的氨基酸顺序
6.基因的结构
7.基因的表达与调控
8.基因的分离
9.基因的合成
第二节 基因的现代概念
1.移动基因
(1)插入序列
(2)转位子
(3)转位作用
(4)逆转位子
2.断裂基因
(1)断裂基因的发现
(2)间隔子位置的测定
(3)间隔子及表达子的一般特点
(4)mRNA初级转录本的剪辑
3.假基因
(1)重复的假基因
(2)加工的假基因
4.重复序列及重复基因
(1)唯一序列及低度重复序列
(2)中度重复序列
(3)高度重复序列
5.重叠基因
第三节 基因工程的诞生及其主要的研究内容
1.基因工程的诞生
2.基因工程的定义及其主要的研究内容
3.有关基因工程安全性的争论
4.重组DNA技术的应用与发展
第二章 基因操作的主要技术原理
节 核酸的凝胶电泳
1.基本原理
2.琼脂糖凝胶电泳
3.脉冲电场凝胶电泳
第二节 核酸分子杂交
1.萨瑟恩DNA印迹杂交
2.诺塞恩RNA印迹杂交
3.斑点印迹杂交和狭线印迹杂交
4.菌落(或噬菌斑)杂交
第三节 细菌转化
1.肺炎链球菌的转化
2.大肠杆菌的转化
3.细菌转化频率
第四节 DNA核苷酸序列分析
1.Sanger双脱氧链终止法
(1)Sanger双脱氧链终止DNA测序法的原理
(2)Sanger双脱氧-M13体系DNA序列分析法
(3)Sanger双脱氧-pUC体系DNA序列分析法
2.Maxam-Gilbert化学修饰法
(1)Maxam-Gilbert化学修饰法的原理
(2)碱基特异的化学切割反应
(3)Maxam-Gilbert化学修饰-CS载体系统DNA序列分析法
(4)Maxam-Gilbert化学修饰法的优点
3.DNA序列分析的自动化
4.DNA杂交测序
(1)DNA杂交测序原理
(2)固定DNA或寡核苷酸的矩阵芯片
(3)杂交的检测
(4)SBH的应用
第五节 基因的化学合成
1.基因化学合成的概况
2.磷酸二酯法合成寡核苷酸
3.磷酸三酯法合成寡核苷酸
4.固相亚磷酸三酯法合成寡核苷酸
5.用寡核苷酸片段组装基因的方式
6.寡核苷酸化学合成的实际用途
(1)作为合成基因的元件
(2)作为核苷酸序列分析的引物
(3)作为核酸分子杂交的探针
(4)用于基因定点诱变研究
(5)作为PCR扩增反应的引物
……
第三章 基因克隆的酶学基础
第四章 基因克隆的质粒载体
第五章 噬菌体载体和柘斯载体
第六章 基因的分离与鉴定