家蚕转基因技术及应用

章家蚕与家蚕转基因节家蚕第二节家蚕转基因一、家蚕转基因的特点/二、家蚕转基因的早期研究/三、家蚕转基因研究现状与发展/参考文献第二章家蚕转基因的载体构建节目的基因的获得一、从基因组DNA文库获取目的基因/二、从cDNA文库获取目的基因/三、通过PCR技术分离目的基因/四、利用电子克隆获取目的基因/五、人工合成目的基因/第二节启动子的选择一、组成型启动子/二、诱导型启动子/三、组织特异性启动子/四、家蚕RNA聚合酶Ⅲ启动子/第三节标记基因一、荧光蛋白基因/二、荧光素酶基因/三、抗性筛选基因/四、其他可视化标记基因/第四节调控元件一、内含子/二、增强子/三、非翻译区/四、绝缘子/五、其他调控元件/第五节家蚕转基因常用载体一、转座载体/二、基因打靶载体/三、人工核酸酶表达载体/四、其他类型载体/第六节转基因载体构建流程一、pSL-FibH-EGFP-LBS中间载体的构建/二、piggyBac重组转座载体的构建/参考文献第三章家蚕外源基因导入技术节胚胎显微注射技术一、家蚕胚胎显微注射仪器的诞生与发展/二、家蚕胚胎显微注射操作流程/第二节介导基因转移技术一、家蚕介导转基因技术的建立/二、家蚕介导转基因操作流程/第三节其他外源基因导入技术一、电穿孔法/二、压力渗透法/三、基因枪法/四、病毒介导法/五、脉冲场电泳法/参考文献第四章转基因家蚕的筛选与鉴定节转基因家蚕的筛选一、荧光标记/二、显性颜色变化标记/三、其他表型变化识别标记/第二节外源基因的整合与表达分析一、外源基因的整合分析/二、外源基因的表达分析/第三节外源基因表达产物的生物活性及功能检测一、表达产物的生物活性分析/二、表达产物的功能测试/第四节内源基因定点突变家蚕的鉴定一、T7E1酶切鉴定内源基因定点突变家蚕/二、其他鉴定突变个体的核酸内切酶/三、限制性内切酶酶切检测法/参考文献第五章基于转座子系统的家蚕基因功能分析技术节GAL4/UAS双元调控技术一、GAL4/UAS系统的基本原理/二、家蚕GAL4/UAS系统的建立/第二节转基因RNAi技术第三节序列捕获技术第四节基因特异表达调控技术一、热激诱导表达技术/二、四环素诱导表达技术/参考文献第六章家蚕基因组编辑技术节家蚕条件基因打靶技术一、位点特异性重组系统概述/二、基于位点特异性重组系统的家蚕条件基因打靶策略/第二节家蚕基因组靶向编辑技术一、基因组靶向编辑技术概述/二、家蚕基因组靶向编辑技术的建立与发展/第三节家蚕基因组编辑技术的优缺点及其发展趋势参考文献第七章转基因家蚕新品种培育节转基因有色茧家蚕新品种培育一、基于色素转运获得的转基因有色茧/二、转荧光蛋白基因有色茧品种培育/第二节高机械性能转基因茧丝家蚕新品种培育一、转蜘蛛丝蛋白基因改良茧丝机械性能/二、转羊毛角蛋白相关蛋白基因改良茧丝机械性能与染色性能/第三节实用性蚕品种转基因技术的建立与应用一、实用性蚕品种转基因技术的建立/二、实用性蚕品种转基因技术的应用/第四节其他转基因家蚕新品种培育一、抗病性转基因家蚕品种培育/二、提高蚕丝产量的转基因家蚕品种培育/三、用作药物筛选模型的转基因家蚕品种培育/参考文献第八章转基因家蚕生物反应器节丝腺生物反应器一、丝腺特异表达系统/二、丝腺生物反应器表达的外源蛋白/第二节脂肪体生物反应器第三节转基因蚕表达外源蛋白存在的问题参考文献第九章家蚕基因功能鉴定与应用节丝蛋白合成与分泌机理一、丝蛋白基因表达与调控/二、茧丝突变家蚕的突变机理/三、丝腺离子环境变化对蚕丝分泌的影响/第二节发育与激素调节一、家蚕保幼激素调控研究/二、家蚕蜕皮激素调控研究/三、其他家蚕发育相关神经肽激素调控研究/第三节性别决定与调控一、Bmdsx基因的功能分析/二、基于Bmdsx基因的性别调控研究/三、性别特异性基因启动子鉴定研究/第四节抗病机理研究一、家蚕内源抗病或免疫相关基因功能鉴定/二、病毒抗性相关基因启动子鉴定研究/第五节食性及化学感受受体研究一、桑树尿素酶基因在家蚕体内表达研究/二、家蚕化学感受受体研究/参考文献第十章家蚕安全转基因技术体系的建立与应用节转基因家蚕存在的主要安全问题一、转基因家蚕自身安全性问题/二、转基因家蚕带来的生态环境安全隐患/第二节基于条件基因打靶的家蚕安全转基因体系建立一、克服转座子整合引起的家蚕转基因安全隐患/二、克服筛选标记基因保留带来的家蚕转基因安全隐患/三、实现外源基因稳定整合、表达以及替换的家蚕安全转基因策略/第三节家蚕安全转基因技术的发展趋势一、不同位点特异性重组系统的联合应用/二、基因组靶向编辑技术与位点特异性重组系统的联合应用/参考文献第十一章家蚕细胞转基因技术及其应用节家蚕细胞系种类与特征第二节家蚕细胞转基因技术的建立一、常用载体/二、家蚕细胞转染方法/第三节家蚕转基因细胞的应用一、家蚕转基因细胞系/二、基因功能研究/三、高效表达外源蛋白/参考文献第十二章转基因家蚕的安全评价与安全管理节概述一、转基因生物及其安全性/二、转基因生物安全性评价与安全管理/第二节安全评价一、评价体系/二、评价原则/三、评价内容和方法/第三节安全管理一、安全管理的目标、任务和原则/二、我国的安全管理体系/三、安全管理的理念与问题/第四节我国转基因家蚕的安全评价与管理一、我国转基因家蚕的安全评价与管理现状/二、我国转基因家蚕实验室研究的安全管理/参考文献后记